A análise da amostra real é interrompida se ocorrerem duas falhas não operacionais consecutivas.

O objetivo da análise da amostra real é determinar a concentração desconhecida da amostra real usando um método de análise previamente totalmente validado (precisão garantida) e a integridade é confiável, ou seja, nenhuma análise de diluição está incluída. Não há falha na reanálise ou na execução da análise, e o objetivo é passar idealmente no teste de reavaliação da amostra (ISR) incorrido, que avalia a repetibilidade do teste.

Quando a amostra real é diluída e reanalisada, se a precisão for avaliada até 10 vezes durante a verificação, ela não deve exceder pelo menos este múltiplo quando aplicada à amostra real. Acima de tudo, é importante selecionar adequadamente a faixa de concentração com antecedência para que a amostra real não seja reanalisada por diluição. No entanto, se a diluição da reanálise for inevitável, o número real de amostras a serem reanalisadas deve ser minimizado para que não exceda um máximo de dezenas. Algo para fazer.

A reanálise é estritamente proibida em princípio. Para os casos em que você já decidiu relatar os dados de reanálise em vez dos dados originais (dados da primeira varredura é uma expressão inadequada), a reanálise é apropriada. Exemplos de erros óbvios incluem erro humano, como erro de preparação (por exemplo, solução de trabalho padrão sem escala ou com nervura dupla), erro de processamento (por exemplo, fixação interna não padrão ou prensagem dupla), erro de usinagem e erro de injeção. , falha de execução e anomalias de predação LLOQ detectadas como uma anomalia e até mesmo reanálise porque esses erros devem ser minimizados.

Por outro lado, por exemplo, a partir da revisão da cinemática (concentração versus gráfico de tempo) ou detecção de anormalidades LLOQ na apresentação (segundo) após washout, a reanálise deve ser limitada (exceto para solicitações do patrocinador). Quando não é tomada a decisão de relatar os dados da reanálise sem os dados originais antes da reanálise por motivos que não sejam erros óbvios, os dados originais e os dados da reanálise são comparados após a reanálise e a diferença está dentro do intervalo permitido. Em caso afirmativo (dentro do intervalo aceitável), os dados originais são selecionados e relatados como dados finais e, se estiverem fora do intervalo aceitável (fora do intervalo aceitável), os dados finais a serem relatados são determinados comparando a soma dos três dados obtidos após nova análise, os critérios a serem determinados neste momento devem ser baseados em julgamentos científicos e justificados.

Um exemplo de reanálise indesejável é uma reanálise de cada amostra real se, em um ciclo, a área do pico padrão interno de cada amostra real desviou +/- 50% de sua média para o controle de qualidade. detectados devido à ausência de uma entrada para o padrão interno e uma entrada dupla, respectivamente). O padrão interno visa não apenas realizar uma análise automatizada da amostra tratada, mas também corrigir a variabilidade do analito que ocorre durante o processamento da amostra. O fato de terem sido observadas flutuações para o analito marcado com isótopo estável como padrão interno (IS ) em , significa que o EI fez sua parte. Portanto, em vez de usar +/- 50% como critério para reanálise, a área do pico analítico (sinal-ruído) da amostra real é comparada à área do pico (sinal-ruído) do controle de baixa qualidade e o controle de alta qualidade para a possibilidade de subestimação ou superestimação.Decidimos reanalisar com base nisso ou não após investigação.

Por outro lado, se o IS não for uma análise SIL, mesmo que seja confirmado durante a verificação que a seletividade e a matriz não afetam a precisão dos QCs, que são substitutos da amostra real, isso não garante necessariamente a precisão da análise da amostra real: deve-se notar que na análise, não é possível ter certeza de que o IS cumpriu fielmente seu papel na correção da variância analítica, não apenas a variância do IS não foi observada, como foi observado.

A reavaliação de amostra incorrida (ISR) compara várias equações de curva padrão de calibração criadas e aplicadas em cada execução durante a análise de amostra real com uma equação de curva padrão de calibração construída e aplicada no ISR para garantir a repetibilidade de cada análise de amostra real.), bem como a consistência durante a execução. -to-run variância na análise de amostra real. Portanto, é preferível realizar o ISR em uma única execução porque é mais importante revisar e avaliar a tendência das diferenças dentro da execução do ISR do que as diferenças do original para cada amostra ISR.

Caso duas ou mais execuções de ISR sejam inevitáveis ​​devido ao número excessivo de amostras de ISR ou limitação da estabilidade do armazenamento real da amostra, etc., será importante reduzir a variação do ISR em execução do padrão de calibração, como como aplicar o mesmo conjunto de QCs em diferentes práticas de ISR ou controlar a variação de lote para lote nos QCs. Se os QCs não forem armazenados, descongelados ou processados ​​como amostras reais, mas forem preparados para cada processo analítico, como padrões de calibração, e processados ​​com amostras reais, após revisão dos resultados ISR, não é possível que este método afete a precisão da análise da amostra real, é importante investigar os impactos potenciais.

Por exemplo, embora o critério de aceitação para ISR seja atendido, o ISR de uma determinada análise se desvia da tendência geral do ISR.

Os métodos de processamento de dados incluem tipo de regressão e tipo de ponderação como parâmetros para construir a curva de calibração padrão e parâmetros como suavização, linha de base e faixa como parâmetros para integração de pico. Em princípio, o método que foi determinado não deve ser alterado uma única vez na verificação até a análise final da amostra real (incluindo ISR). Se a mudança for inevitável, a mudança deve ser baseada em razões justificáveis, e a consistência deve ser mantida pelo menos quando a mudança for aplicada a todos os dados obtidos desde a verificação até a análise. Deve-se notar que a variação na inclinação da curva padrão de calibração e a interseção do eixo y entre corridas analíticas, desde que a corrida passe pelo menos por preparação, armazenamento, dissolução, processamento e análise equivalente a critérios de aceitação que atendam aos critérios de aceitação critério. Determine se essa execução é aprovada ou reprovada.

O desenvolvimento deve ser projetado e implementado com o objetivo de verificação rápida e precisa de erros, e a verificação deve ser realizada para garantir na prática a confiabilidade da análise precisa de amostras reais, ou seja, erros e problemas em cada processo de análise (reanálise e ISR) devem ser projetados e implementado em conformidade. Ao analisar amostras reais, é importante relatar qualquer processo analítico sem falhas.

Em particular, verifique se não há erros óbvios (por exemplo, erros humanos ou de desempenho), mas também falhas interessantes, cujas causas não são claras. Após a solução, você deverá verificar novamente a análise.

Para não prejudicar a confiabilidade, é necessário estabelecer critérios de reanálise baseados em julgamentos científicos e fundamentados e aplicá-los consistentemente à análise da amostra real. Os resultados reais da análise da amostra serão relatados com garantia de confiabilidade e repassados ​​de forma rápida e tranquila ao patrocinador e ao FDA.